抑制消减杂交技术(SSH)

栏目:行业资讯 发布时间:2012-02-28
抑制消减杂交技术(SSH)是一种比较和分离不同细胞系、不同组织间或同一细胞系、同一组织间在不同条件下差别表达基因的方法。

抑制消减杂交技术(SSH)是一种比较和分离不同细胞系、不同组织间或同一细胞系、同一组织间在不同条件下差别表达基因的方法。它主要基于抑制性PCR , 并结合均一化和消减杂交的技术,在非目的双链片段两端接上同一接头,使其具有反向末端重复序列,在PCR 中不能扩增, 从而达到抑制非目的片段而选择性扩增目的片段的目的。均一化步骤平衡了目的基因群中cDNA 的丰度, 即低丰度差异表达的基因不会丢失,而高丰度差异表达的基因又不会被过量分离,消减杂交则消除了目的基因群( tester) 与驱赶基因群(driver) 间的同源序列。高富集度,低背景和消减混合物中cDNA丰度的均一化使SSH成为差异表达基因cDNA快速克隆的理想方法。更重要的是,用未被克隆的消减cDNA混合物作为杂交的探针的可行性使SSH成为通用、强有力技术。

下一篇: 没有了